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       INSTITUTO DE BIOMEDICINA DE VALENCIA
SERVICIO DE MICROSCOPIA
Y CITOMETRÍA


Servicio de Microscopía y Citometría

Instituto de Biomedicina de Valencia

 

 

PRESENTACIÓN

EQUIPOS

NORMAS

MANUALES Y MÉTODOS

ENLACES

 

Microscopios confocal y microscopio vertical

Microscopio confocal Leica SP8

-Sistema Confocal Espectral Leica TCS SP8 acoplado a un microscopio invertido DMI 6000 con platina motorizada, platina galvanométrica, equipo de epiiluminación EL6000, con óptica para contraste interferencial y cámara con control de temperatura y CO2 para trabajar en vivo.

-Diodo para ultravioleta de 405nm y siete líneas de láser: 458, 476, 488, 496, 514, 561 y 633nm.

-Tres fotomultiplicadores más un detector híbrido del tipo HyD, más uno para luz transmitida.

-Se pueden obtener imágenes de hasta 8192 x 8192 pixeles. Presenta el programa LAS X con modulos para colocalización, FRET y FRAP, el modulo Live Data Mode para programación de experimentos avanzados de time-lapse y el Dye Finder para la separación de marcadores de emisión superpuesta. Permite marcar posiciones en la muestra, se puede construir imagenes de gran tamaño a partir de imagenes individuales y la proyección de pilas de imagen en tres dimensiones.

-Utiliza los siguientes objetivos:

Tipo objetivo

Resolución (nm) (xy/z)

Aumento/apertura

Distancia libre de trabajo (mm)

referencia

HCXPL APO CS aire

488 / 2630,42 10x / 0.40 2.2 11506285

HCXPL APO CS aire

278.86 / 768,22 20x / 0.70 0.590 11506513

HCXPL APO CS2 aceite

150.15 / 299,1 40x / 1.30 0.240 11506358

HCXPL APO CS2 aceite

139.43 / 235,82 63x / 1.40 0.140 11506350

HCXPL APO CS2 agua

162.67 / 290,28 63x /1.20 0.300 11506346

SP8

Microscopio vertical automatizado para luz transmitida y fluorescencia con Sistema de imagen THUNDER

Características:
Microscopio vertical automático Leica DM6 B
Revólver motorizado con objetivos 2.5x, 10x, 20x, 40x en seco y 63x de aceite. Enfoque motorizado. Función de parafocalidad electrónica. Platina motorizada en XY.
Luz transmitida: Iluminación por LED blanco. Técnicas de campo claro, contraste de fases y contraste interferencial. Cámara DMC5400 con 20 MP de resolución.

Fluorescencia: Iluminador con 5 LEDs que cubren el rango desde 390 hasta 680 nm. Filtros DAPI, GFP, RHO, TXR y Cy5. Cámara monocroma de alta sensibilidad Leica k5

Software de imagen Las X con aclaramiento computacional "THUNDER"

confo

 

Contenido de los videos de formación

1- Configuración de la cámara de color
Balance de Blancons
Ajuste del tiempo de exposición. Autoexposición
Histograma
Control de la saturación del color
Formato de la imagen
Smooth rendering

2- Ajuste de diafragmas de apertura y de campo
Formato de la imagen II
Guardar settings de usuario
Navegador
Tile Scan Merge
Corrección de Sombreado

3- Autofotos con distintos valores de brillo/contraste
Control del color
Perfiles de cámara: configuración de perfiles personales

4- FLUORESCENCIA
Configuración de la cámara de Blanco y Negro
Configuración de los canales de Fluorescencia
Tiempo de exposición e intensidad de la luz

5- Ajustes de la imagen de fluorescencia
Formato de la imagen

6- Ajuste de la imagen de fluorescencia II
Thunder: Algoritmo I  Aclaramiento computacional

7- Hacer stacks
Recorte de stacks innecesarios
Proyección 3D

8- Explicación de cómo funciona el algoritmo Thunder
Algoritmos thunder II y III  Aclaramiento computacional + deconvolución

9- Cómo aplicar Thunder a una imagen ya adquirida.
Configuración de parámetros Thunder
Cómo ajustar imágenes con diferentes planos de foco en cada canal (RFC)

10- 11- 12- Navegador

 

 

 

 

 

Video de formación 1

Video de formación 2

Video de formación 3

Video de formación 4

Video de formación 5

Video de formación 6

Video de formación 7

Video de formación 8

Video de formación 9

Video de formación 10

Video de formación 11

Video de formación 12

Microscopio vertical

-Microscopio vertical Leica DM RXA2 completamente motorizado. Técnicas de campo claro, campo oscuro, contraste de fases y contraste interferencial. Equipado con epi-iluminación UV y filtros (ver arriba la lista de filtros disponibles) para microscopía de fluorescencia.

Programa Leica IM50 para la toma y gestión de imágenes y Leica FW4000 que permite programar el microscopio para la toma de imágenes con diferentes filtros, diferentes posiciones en un plano y en profundidad así como la tomas de imagenes a diferentes tiempos.

Presenta una cámara Leica DFC300 FX a color indicada para microscopía de fluorescencia y de campo claro y una cámara Leica DFC350 FX monocroma de alta sensibilidad, indicada para microscopía de fluorescencia.

vertical

-Objetivos:

Tipo objetivo

Resolución (nm) (xy/z)

Aumento/apertura

Distancia libre de trabajo (mm)

Referencia

N PLAN aire

2788,6 / 89522,7

2,5 x / 0,07

11,20

11 506 083

HC PL FLUOTAR aire

650,7 / 4767,6

10 x / 0,30

11

11 506 507

HC PL FLUOTAR aire

390,4 / 1639,1

20 x / 0,50

1,15

11 506 506

HCX PL FLUOTAR aire

nd

40 x / 0,75

0,40

11 506 145

HCX PL FLUOTAR aceite

nd

63 x / 1,25

0,19

11 506 185

HCX PL FLUOTAR aceite

150,2 / 299,1

100 x / 1,30

0,13

11 506 197

Citómetro: MACSQuant® Analyzer 10 - Miltenyi Biotec

-El MACSQuant Analyzer 10 es un citómetro de flujo de alta sensibilidad para análisis celulares multiparamétricos. Es un instrumento totalmente automatizado en los procesos de puesta en marcha, calibración, compensación, limpieza y cierre del sistema.
Está equipado con tres láseres (405, 488, 638 nm) y diez detectores: dos de dispersión FSC y SSC y 8 canales de fluorescencia. El aparato permite la adquisición de muestras en numerosos formatos de tubo e incluso en placas de microtitulación.


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